Partie 2 : Matériels et méthodes
I. Type, lieu et calendrier de l’étude
Type
Nous avons réalisé une étude cas témoin
Lieu
Nous avons recrutés les participants au quartier ‘’La Poudrière’’ de l’arrondissement 4 Moungali, dans les buvettes (bars, resto-bars et caves).
Au CHU de Brazzaville, Laboratoire de Biochimie pour le dosage des paramètres.
Calendrier de l’étude
Notre étude s’est déroulée pendant six mois, de juillet à décembre 2018.
II. Population générale
Critères d’inclusion
Pour les abstentionnistes
Nous inclus dans notre étude toute personne répondant aux critères suivants:
Age: 18 ans et plus
Sexe: homme et femme
Consentement: ayant donné son consentement éclairé
Alcool: ne pas avoir consommé de l’alcool depuis les 12 mois ayant précédé la période d’étude
Pour les consommateurs
Avoir consommé de l’alcool dans les 12 mois précédant l’enquête
Avoir consommé de l’alcool au moins une fois le mois précédent l’enquête
Critères de non inclusion
Nous n’avons pas pris dans cette étude tant pour les consommateurs que les abstentionnistes, les personnes avec les caractéristiques suivantes:
Obésité
Générale : toute personne ayant un IMC supérieur à 25
Abdominale: toute personne ayant un tour de taille supérieur à 94 cm pour les hommes et supérieur à 88 cm pour les femmes
Malnutrition: toute personne ayant un IMC inférieur à 18
Diabète: toute personne diabétique connue
Hypertension:
Toute personne ayant une pression artérielle supérieure à 140 mmHg en systole et supérieure à 90 mmHg en diastole à la mesure.
Toute personne hypertendue connue.
Autres facteurs de risque: toute personne ayant une histoire de maladie ou autre facteurs de risque en dehors des facteurs précités.
NB: Pour les consommateurs, toute personne ayant consommé de l’alcool sous une autre forme que la bière.
Echantillonnage
Méthode d’échantillonnage
La méthode d’échantillonnage était exhaustive non probabiliste, c’est-à-dire que toutes les personnes n’ont pas la même chance d’être représentées.
Taille initiale de l’échantillon
La taille initiale de l’échantillon était prévue à 120 participants répartis dans quatre groupes, soit :
30 consommateurs faibles
30 consommateurs modérés
30 consommateurs abusifs
30 abstentionnistes
Taille finale de l’échantillon
A la fin de notre investigation, nous retenu quatre-vingt-un (81) participants soit :
12 consommateurs faibles
29 consommateurs modérés
21 consommateurs abusifs
19 abstentionnistes
Collecte des données
Nous avons récoltés les données auprès des personnes elles-mêmes directement au moyen d’un questionnaire (voir annexe) à remplir avant de réaliser la prise de sang.
Répartition des groupes
A été considéré comme consommateur, toute personne ayant bu au moins une bouteille de boisson alcoolique durant le mois précédent l’étude. Nous avons retenu dans notre étude toute personne dans la cité ayant accepté de participer à l’étude. Ces sujets, pris au hasard, ont été sélectionnés selon nos critères d’inclusion.
Nous avons réparti notre population d’étude en quatre groupes comme suit :
Consommateurs faibles :
Personnes qui consomment moins de 15g/j d’alcool, soit moins d’une bouteille de 33 cl à 5° par jour;
Consommateurs modérés
Personnes qui consomment 15 à 45g /j d’alcool soit une à trois bouteilles de 33 cl à 5° par jour;
Consommateurs abusifs
Personnes qui consomment plus de 45g/j d’alcool soit plus de 3 bouteilles de 33 cl à 5° par jour.
Abstentionnistes
Personnes n’ayant jamais consommées d’alcool de leur vie ou pas consommée d’alcool il y a plus de douze (12) mois;
III. Méthodes d’investigation
Investigations anthropométriques
Nous avons mesuré la taille, le poids, le tour de taille et la pression artérielle d’après la méthode STEP1.
Mesure taille
Nous avons utilisé une toise fournit par Dafra Pharma.
Mesure poids
Le poids a été mesuré à l’aide d’une balance analogique de la marque GEEPAS de GEEPAS Industrial Co. LTD, chez des personnes vêtues en vêtements légers.
Mesure tour de taille
Nous nous sommes servis d’un mètre ruban. Le tour de taille a été mesuré chez une personne debout après une expiration non forcée entre la partie inférieure de la dernière côte et la crête iliaque.
Mesure pression artérielle
Nous avons utilisé un tensiomètre manuel de la marque Spengler avec brassard et stéthoscope. La tension a été prélevée chez une personne assise après un repos de 15 minutes.
Prélèvement des échantillons
Nous avons prélevé 4 ml de sang après observation d’un jeune de 12 heures chez chaque participant le matin en position assise par ponction veineuse franche au pli du coude à l’aide des aiguilles de type Vaccuitener. Le sang a été recueilli dans un tube sec sous vide pour le dosage du cholestérol, des triglycérides et du HDL.
1 Partie 3_Section 4 : Guide sur les mesures physiques (Step 2), OMS
Conservation des échantillons
Nous avons centrifugé les tubes à 3000 tours par minute pendant 10 min puis, conservé les sérums à -80°C jusqu’à l’analyse.
Analyse des échantillons
Le spectrophotomètre CYAN SMART a été utilisé pour tous les dosages du cholestérol, triglycérides et HDL.
Dosage du cholestérol
Nous avons utilisé le réactif CHOLESTEROL ( Enzymax ) Single Reagent de VITRO SCIENT., Germany.
III.4.1.1 Principe
C’est celui décrit par Allain et al. en 1974, avec quelques modifications. Nous avons divisé par trois les quantités de réactifs et échantillons.
C ho l e t é r o l e st é r ifi é C ho l e s t é r o l E s t e r a s e ( C E ) C ho l e s t é r o l A G L
C ho l e s t é r o l O C ho l e s t é r o l O xy da s e ( C O ) Ch o l e st e n o n e 3 H O
222
2 H O P h e n o l P A P P e r o xy d a s e ( P O D ) Q u i n o n e i m e 4 H O
222
Dans la pratique, 10µl de sérum ont été incubé avec 1ml de réactif pendant 5 mn à 37°C et l’absorbance été mesuré à 500 nm contre le blanc, comme le résume le tableau suivant.
Tableau IV: Procédure de dosage du cholestérol total
Dosage des triglycérides
Principe
Nous avons utilisé la réaction décrite par Piero Fossati et Lorenzo Prencipe en 1982, couplée à la réaction de Trinder P. (1969).
T r i g l ycér i d e s L i pa s e G l ycér o l
AGL
Glycérol
AT P G l yc é r o l K i n a s e ( G K ) G l ycér o l 3 P h o s p h a t e
ADP
2
Glycérol 3Phosphate O ‡ˆ ˆˆGPˆˆOˆ†ˆDHAphosphate H O
22
2 22
H O 4chlorophénol PAP GPO Quinonei min e H O
L’absorbance de la quinonéimine est mesurée à 500 nm et est proportionnelle à la concentration en triglycérides de l’échantillon.
Procédure
Ajouter 10 µl de l’échantillon à 1mL de réactif de travail.
Mélanger et laisser reposer le tout pendant 5 minutes à 37°C ou 10 minutes à température ambiante, puis lire l’absorbance contre le blanc à 510 nm.
Tableau V: Procédure dosage TG
Dosage du HDL-c
Principe
Les lipoprotéines de faible densité (LDL et VLDL) sont précipitées spécifiquement par l’acide phosphotungstique et les ions magnésiums et peuvent ainsi être séparer par centrifugation, les lipoprotéines à haute densité (HDL) restent en suspension. La détermination de HDL se fait en utilisant un surnagent clair, avec la méthode de Alain précédemment décrite.
Tableau VI: Procédure de dosage du HDL
Calcul du LDL-c
Nous avons utilisés la formule décrite par William T. Friedewald et ses collaborateurs en 1972, pour estimer la concentration de LDL connaissant celles du cholestérol total, triglycérides et HDL(Friedewald W. T. 1972).
LDL = Cℎolestérol total − (HDL +
Variables et critères de jugement
Variables anthropométriques
Indice de masse corporelle (IMC) Tableau VII: Critères de jugement de l’IMC Valeurs IMCInterprétation
˂ 20Maigreur
20-25Poids normal
25-30Surcharge pondérale
˃30Obésité
Triglycérides
)
5
Tour de taille
Le tableau ci-après consigne, chez les hommes comme les femmes, les valeurs normales ce paramètre. Au-delà, la personne est en surpoids.
Tableau VIII: Critères de jugement du tour de taille Tour de taille (cm)
Hommes≤ 94
Femmes≤ 88
Pression artérielle
Nous avons considéré comme hypertendue, toute personne ayant une valeur de la tension artérielle au-delà de celles consignées dans le tableau suivant (Kimbally kaky 2004):
Tableau IX: Critères de jugement de la Tension artérielle
Variables biologiques
Cholestérol total
Le taux normal de cholestérol est maintenu ≤ 2 g/L soit 5,18 mmol/L. Tableau X: Valeurs de référence du cholestérol total
Triglycerides
Tableau XI: Valeurs de référence des triglycérides Triglycéridesg/Lmmol/L Valeur recommandée0,35 – 1,600,40 – 1,82
HDL-cholestérol
Tableau XII: Valeurs de référence du HDL
LDL-cholestérol ;
Tableau XIII: Valeurs de référence du LDL
IV. Ethiques
La présente étude a été validée par le Comité d’Ethique de la Recherche en Sciences de la Santé sous le numéro N°110/MRSIT/IRSSA/CERSSA
V. Analyses statistiques
Programmes utilisés
Microsoft Office Excel 2013 pour élaborer la base de données ;
Graph Pad version 5.02 pour l’analyse des données et la réalisation des graphiques
Test effectués Nous avons calculé :
La moyenne L’écart type
Puis effectué le test ANOVA à une voie pour comparer les moyennes de chaque variable. Nous avons considéré le test comme significatif à une valeur de P˂0,05
VI. Résultats
Caractéristiques de la population
Nous avons déterminé les caractéristiques de la population de notre étude en comparant les différents paramètres sociodémographiques, anthropométriques et physiologiques des différents groupes.
Paramètres sociodémographiques
Répartition des deux populations selon l’âge et le sexe
Abstentionnistes
Faibles
Modérés
Abusifs
P-
Tableau XIV : Répartition de la population selon le sexe et la moyenne d’âge
25
20
20
18
15
14
10
10
8
6
5
4
1
0
18 à 24 ans
25 à 31 ans
32 à 38 ans
Tranches d’âge
39 à 45 ans
˃ 45 ans
ConsommateursAbstentionnistes
Effectif
Répartition de la population selon les tranches d’âge
Figure 17: Répartition des deux populations selon la tranche d’âge
Les tranches d’âge de 18 à 24 ans et de 25 à 31 ans étaient les plus représentées.
Répartition des deux populations selon le niveau d’instruction
Répartition des consommateurs
N=62 2% 34% 32% 32% PrimaireCollègeLycéeUniversité
Figure 18: Répartition des consommateurs selon le niveau d’instruction
Plus du quart (34%) des consommateurs avaient un niveau universitaire.
Répartition des abstentionnistes
N=19 Collège Lycée Université 5% 16% 79%
Figure 19: Répartition des abstentionnistes selon le niveau d’instruction
Les abstentionnistes avaient surtout un niveau universitaire (79%) et 16% d’entre eux étaient au lycée.
Consommateurs Abstentionnistes
20
19
18
18
16
16
14
14
12
10
8
6
5
4
4
4
2
1
0
Sans profession
Elève/Etudiant
Fonctionnaire
Professions
Privé
Libérale
Effectif
Répartition des deux populations selon le secteur d’activité
Figure 20: Répartition de la population selon la profession
Cette figure montre que dans les deux groupes, la catégorie élève/étudiant est la plus représentée dans la profession.
Répartition des consommateurs selon les habitudes de consommation
Répartition des consommateurs selon la date de dernière consommation
16% 1 mois 16% 1 semaine ˂ 1 semaine 68%
Figure 21: Répartition des consommateurs selon la date de dernière consommation
La plupart des consommateurs (68%) avaient bu de l’alcool moins d’une semaine avant le recrutement.
Répartition des consommateurs selon le nombre de bouteilles consommé par jour
N=62 19% 34% ˂ 1 bouteille 1 – 2 bouteilles 15% 2 – 3 bouteilles ˃ 3 bouteilles 32%
Figure 22: Répartition des consommateurs selon le nombre de bouteilles consommées
Nous avons noté plus de consommateurs modérés, répartis entre ceux qui buvaient plus de 3 bouteilles (34%) et ceux qui n’en prenaient que 2 (32%).
Répartition des consommateurs selon la fréquence hebdomadaire de consommation
N=62 19% 44% 1 fois la semaine 2-3 fois la semaine 4-5 fois la semaine 18% Chaque jour 19%
Figure 23: Répartition des consommateurs selon la fréquence de consommation hebdomadaire
La moyenne hebdomadaire de consommation était de 1,5 et 44% des consommateurs buvaient au moins une fois par semaine.
Anthropométriques
Tableau XV: Comparaison des moyennes et écart type des paramètres anthropométriques
IMC = Indice de masse corporelle
Nous n’avons observé aucune différence statistiquement significative entre consommateurs et abstentionnistes en ce qui concerne le tour de taille et l’IMC. Alors qu’elle l’est pour le poids (P=0,0461).
Cliniques
Tableau XVI: Moyennes de pression artérielle dans chaque groupe
VariablesAbstentionnistesFaiblesModérésAbusifs PAS (mm
ANOVA, P
Hg)113,45±8,55119,75±10,82121,24±14,03119,05±7,180,07475
PAD (mm
Hg)81,58±8,3478,75±10,4782,57±11,3877,05±5,920,1891
PAS = Pression Artérielle Systolique PAD = Pression Artérielle Diastole
Il n’existe aucune différence statistique pour la pression artérielle entre consommateurs et abstentionnistes.
Profil des marqueurs lipidiques dans chaque groupe
Variables
Tableau XVII: Taux des marqueurs lipidiques dans chaque groupe
P
Aucune différence statistique n’a été observée entre consommateurs et abstentionnistes en ce qui concerne les marqueurs lipidiques.
140,0 132,1 127,9 129,8 120,0 106,2 98,9 100,0 88,2 88,0 81,4 80,0 75,6 72,9 64,2 60,0 47,9 44,2 40,0 37,5 37,8 40,6 20,0 0,0 CT HDL TG LDL Marqueurs lipidiques ˂ 1 bouteille1 à 2 bouteilles2 à 3 bouteilles˃ 3 bouteilles Moyenne lipide en mg/dl Moyenne des lipides selon le nombre de bouteilles consommées par jour
Figure 24: Moyennes des marqueurs lipidiques des consommateurs selon la dose journalière
La figure montre que les moyennes de cholestérol total de triglycérides et LDL étaient légèrement plus élevés chez ceux qui consommaient 2 à 3 bouteilles par jour que d’autres. Cependant, la moyenne de HDL était plus haute chez ceux qui consommaient moins d’une bouteille par jour.
