L’étude vise à déterminer la prévalence des vaginites et vaginoses chez les femmes admises au CHU-MEL, révélant une perturbation de la flore vaginale chez 56% des femmes et Candida albicans comme germe le plus isolé.
Direction des écoles privées de l’enseignement supérieur (DEPES)
Institut supérieur de formation professionnelle et d’appui à la sécurité économique (IS-FOPASE)
Domaine : Science et technologie – Option : Génie chimique et biologique
Spécialité : Technologies biochimiques et biomédicales
Rapport de fin de formation en vue de l’obtention du grade de licence professionnelle
Prévalence des vaginites et des vaginoses chez les femmes admises au CHU-MEL de janvier 2021 à mars 2023
Lauret Kryst-Sasler Chacha
Dirigé par: Monsieur Ramanou Sanni & Professeur Adam Gbankoto
Année académique 2022-2023 – 16e promotion
CERTIFICATION
Je soussigné M. Adam GBANKOTO certifie que M. Lauret Kryst-Sasler CHACHA a respecté les orientations convenues d’un commun accord pour la réalisation de son travail de fin de formation effectué par son soin et en parfaite harmonie avec les prescriptions de l’équipe scientifique de son encadrement.
Professeur Adam GBANKOTO
Professeur Titulaire des Universités du CAMES
LISTE DES ENSEIGNANTS
NOMS & PRENOMSGRADEMATIERES ENSEIGNEESAKPONA SimonProfesseur titulaireBiochimie : Clinique, structurale,MétaboliqueLOKO FrédericProfesseur titulaireBiochimie : Clinique, structurale,MétaboliqueBANKOLE HonoreProfesseur TitulaireBactériologieGBANKOTO AdamProfesseur TitulaireBiologie cellulaire ; Méthodologie deRechercheFAGNISSE SiméonMaitre de ConférenceStatistiquesADECHINAN JosephMaitre-AssistantPhysiques ; BiophysiqueFAH LaurisMaitre-AssistantImmuno- Hématologie ; TransfusionSanguineOTTI AndréMaitre-AssistantSoins Infirmiers et PhlébotomieTOPANOU AdolpheDocteurHématologieKELOMEY AudeDocteurHémostaseN’TCHA ChristineDocteurMycologie ; MicrobiologieMédicale ; Hygiène et Qualité ; BactériologieALAPINI FranckDocteurAnatomie Générale, Fonctionnelle,GénétiqueNOUDJIEGBE AdrienDocteurHémopathieCytologie SanguineKAKPO BlandineDocteurChimie Générale et OrganiqueBOYA BawaDocteurVirologie Environnement ProfessionnelLégislationSOCOHOU AkimDocteurBiologie Moléculaire ; BiologieMédicaleAISSI Jean RoitinosDocteurTechnique d’Expression et Méthodede CommunicationTOWA SELLO JoinyDocteurAnglaisTOSSAVI DariusDocteurParasitologie
HESSOU DJOSSOU DonaldDoctorantImmunologie Générale I & IITCHIBOZO SergeIngénieur StaticienMathématiques GénéralesKAPO JudicaëlIngénieur MédicalTechniques Instrumentales ;SérologieHOUNKPATIN GuyJuristeDroit du TravailZINSOU GodefroyTechnicien BiologisteTravaux Pratiques
DEDICACE
A toute ma famille pour son soutien tout au long de mon parcours universitaire.
REMERCIEMENTS
Au-delà de la volonté divine qui est une grâce, ce travail est l’œuvre de certaines personnalités émérites qui ont consenti des efforts pour me voir réussir. J’exprime ici mes profondes et sincères gratitudes.
• A ma mère Madame Joseline DANDJINOU, merci pour l’effort suscité en nous, trouvez ici un bout de la récompense de tous les efforts consentis depuis toutes ses années.
• A mon feu père Monsieur Réné CHACHA, merci pour la confiance que vous avez toujours eue en nous.
• A mon superviseur Professeur Adam GBANKOTO, malgré vos multiples occupations, vous avez accepté assurer la supervision de ce travail. La perspicacité de vos remarques, votre rigueur scientifique et votre esprit de synthèse ont été précieux dans l’élaboration de ce travail.
• Au directeur général du CHU MEL Lambert LOKO TONOUDJI et à l’administration.
• Aux responsables du laboratoire CHU MEL, Docteur Simon AZOMBAKIN et
Docteur Adicatou Laï ADEOTHY pour la qualité de la formation.
• Aux surveillantes du laboratoire Madame Diana ANTONHY et Madame Mireille ASSOGBA ainsi qu’au personnel du laboratoire pour la qualité de l’encadrement qui nous a été offerte.
• A Monsieur Ramanou SANNI, bio technologiste au laboratoire du CHU-MEL, pour sa patience sa disponibilité et surtout ces judicieux conseils qui ont contribué à alimenter notre réflexion. Merci.
• A mon frère Lionel SOARES et ma sœur Lynda TOUMADJE, merci pour votre soutien au quotidien.
• A tous les enseignants et techniciens de l’IS FOPASE, vous nous avez donné une formation soutenue, riche de savoir-faire et de savoir-être. Que ce travail soit pour nous, l’élément propulseur qui nous permettra de suivre vos pas.
• A toute l’équipe du laboratoire du CHU-MEL, merci pour le soutien et vos apports pour la réalisation de ce travail.
• A Mes camarades de la seizième promotion. Pour nos moments de peines et de joies. Plein succès et brillante carrière à tous.
HOMMAGES
• A son excellence le Président du jury
Nous vous savons gré de l’honneur que vous nous faites en acceptant de présider ce jury malgré vos multiples responsabilités et de nous permettre de puiser dans vos remarquables qualités scientifiques et humaines. Veuillez trouver ici, l’expression de notre sincère considération.
• Aux honorables membres de jury,
C’est un réel plaisir que vous nous faites en acceptant de juger ce travail. Vos remarques et suggestions seront prises en compte pour améliorer la qualité scientifique de ce rapport. Nous vous prions d’accepter l’expression de notre profonde gratitude.
LISTE DES SIGLES
C. albicans : Candida albicans
CHU – MEL : Centre Hospitalier Universitaire de la Mère et l’Enfant Lagune
DBI : Densité Bactérienne Insuffisante
ECB : Examen Cytobactériologique
GEDP : Goutte épaisse et Densité Parasitaire
Hte : Hématocrite
IS – FOPASE : Institut Supérieur de Formation Professionnelle et d’Appui à la Sécurité
NFS : Numération de la Formule sanguine
pH : Potentiel Hydrogène TP : Taux de Prothrombine TC : Temps de Coagulation TQ : Temps de Quick
TCK : Temps de Céphaline Kaolin
T. vaginalis : Trichomonas vaginalis
Tx d’HB : Taux d’hémoglobine
VB : Vaginose bactérienne
LISTE DES TABLEAUX
Tableau I : Tableau récapitulatif des activités réalisées au laboratoire 5
Tableau II : Prévalence des principales bactéries présentes dans la flore normale et au cours de la vaginose bactérienne 17
Tableau III : Diagnostic différentiel des principales vaginites 24
Tableau IV : Répartition de la population d’étude selon l’aspect, les leucocytes, les hématies et les cellules épithéliales 33
Tableau V : Répartition des sujets en fonction du score de Nugent 35
Tableau VI : Répartition selon la nature de la flore 35
Tableau VII : Répartition de la flore vaginale en fonction des germes isolés, de l’état physiologique des femmes et les motifs de consultation 36
LISTE DES FIGURES ET PHOTOS
Figure 1 : Frottis sanguin et la Goutte Epaisse Technique 9
Figure 2 : Les organes de reproduction dans le pelvis 16
Figure 3 : Répartition des patientes selon l’âge 32
Figure 4 : Répartition des patientes selon leur état physiologique 32
Figure 5 : Répartition selon le motif de consultation 32
Figure 6 : Répartition de la population d’étude selon les résultats de culture et des germes isolés 34
Figure 7 : Répartition des femmes atteintes de vaginite à C. albicans en fonction de leur état physiologique 34
Figure 8 : Répartition des femmes atteintes de vaginose bactérienne en fonction de leur état physiologique 36
Photo 1 : Vaginite à bactéries Gram négatif 19
Photo 2 : Leucorrhées abondantes de la vaginose bactérienne 20
Photo 3 : » Clue-cell » identique à Bacilles Gram négatif 22
BIBLIOGRAPHIE
• Bergogne-Bérézin E. Flores vaginales normales, vaginites et vaginoses bactériennes : diagnostic et thérapeutique. Antibiotiques. 2007, 44-139
• Danielsson D, Teigen PK, Moi H. The genital econiche: focus on microbiota and bacterial vaginosis. Ann N Y Acad Sci. 2011, 48–58
• JL Avril, H Dabernat, F Denis, H Monteil, Bactériologie clinique. Ellipses. 2000
• 2000-Bioforma-19-Vaginites et vaginoses
• Clara Guion. Prise en charge de la vaginose bactérienne chez les femmes enceintes, en post partum, allaitantes et en âge de procréer : pratiques des sages-femmes de la région Sud. Gynécologie et obstétrique. 2019. dumas-02380689
• Muhleisen AL, Herbst Kralovetz MM. Menopause and the vaginal microbiome. Maturitas. 2016, 42–50
• Denis F, Bactériologie médicale. Elsevier Masson. 2016
• Verstraelen H, Verhelst R, Claeys G, De Backer E, Temmerman M, Vaneechoutte M. Longitudinal analysis of the vaginal microflora in pregnancy suggests that L. crispatus are more conducive to the occurrence of abnormal vaginal microflora. BMC Microbiol. 2009.
• Patterson JL, Stull-Lane A, Girerd PH, Jefferson KK. Analysis of adherence, biofilm formation and cytotoxicity suggests a greater virulence potential of Gardnerella vaginalis relative to other bacterial-vaginosis-associated anaerobes. Microbiology. 2010, 9-392
• Gouvernement du Canada A de la santé publique du C. Pertes vaginales (vaginose bactérienne, candidose vulvo-vaginale, trichomonase) – Agence de la santé publique du Canada. 2013
• Tachedjian G, Aldunate M, Bradshaw CS, Cone RA. The role of lactic acid production by probiotic Lactobacillus species in vaginal health. Res Microbiol. 2017, 92-782
• L. AVANON, N. CHITOU. Bilan des quatre dernières années des germes isolés des échantillons de secretions cervico-vaginales chez les femmes enceintes à l’HOMEL. 2012
• Marieb E. Anatomie et Physiologie humaine. Pearson education, 2005
• Rajaà ELMOGHAZLI. Profil microbiologique des infections vaginales. 2018
• Marion Marie. Intérêt des probiotiques dans la prise en charge des infections vaginales à l’officine. Sciences pharmaceutiques. 2018. dumas-01962203
• A. SEDALLIAN, G. ANTONIOTTI et St. BLAND. Les germes responsables des vaginoses bactériennes. Méd Mal Infect.1995; 25,RICAI:791-5
TABLE DES MATIERES
CERTIFICATION 3
LISTE DES ENSEIGNANTS i
SOMMAIRE i
DEDICACE i
REMERCIEMENTS ii
HOMMAGES iii
LISTE DES SIGLES iv
LISTE DES TABLEAUX v
LISTE DES FIGURES ET PHOTOS vi
RESUME vii
ABSTRACT viii
INTRODUCTION 1
CHAPITRE I : COMPTE RENDU DU STAGE 2
• CADRE DE FORMATION ET DU STAGE 3Cadre institutionnel de la formation 3Présentation du lieu de stage 3Description et fonctionnement du laboratoire 3Appareils 4Matériels et outils de travail 4COMPTE RENDU DU STAGE D’OBSERVATION ET D’IMMERSION 5COMPTE RENDU DU STAGE DE PROFESSIONNALISATION 6Le prélèvement 6Matériel de prélèvement 6Technique de prélèvement (par la voie veineuse) 7Section de la sérologie : Dosage de la Protéine C Réactive (CRP) 7Test qualitatif 7Test quantitatif 8Section d’Hématologie-Parasitologie 8Parasitologie 8Hématologie : Dosage du taux d’hémoglobine 10Section de la biochimie : Dosage de la glycémie 10Section de la bactériologie 11ECBU 11ATB 12
• CADRE DE FORMATION ET DU STAGE 3Cadre institutionnel de la formation 3Présentation du lieu de stage 3Description et fonctionnement du laboratoire 3Appareils 4Matériels et outils de travail 4
• Cadre institutionnel de la formation 3
• Présentation du lieu de stage 3Description et fonctionnement du laboratoire 3Appareils 4Matériels et outils de travail 4
• Description et fonctionnement du laboratoire 3Appareils 4Matériels et outils de travail 4
• Appareils 4
• Matériels et outils de travail 4
• COMPTE RENDU DU STAGE D’OBSERVATION ET D’IMMERSION 5
• COMPTE RENDU DU STAGE DE PROFESSIONNALISATION 6Le prélèvement 6Matériel de prélèvement 6Technique de prélèvement (par la voie veineuse) 7Section de la sérologie : Dosage de la Protéine C Réactive (CRP) 7Test qualitatif 7Test quantitatif 8Section d’Hématologie-Parasitologie 8Parasitologie 8Hématologie : Dosage du taux d’hémoglobine 10Section de la biochimie : Dosage de la glycémie 10Section de la bactériologie 11ECBU 11ATB 12
• Le prélèvement 6Matériel de prélèvement 6Technique de prélèvement (par la voie veineuse) 7
• Matériel de prélèvement 6
• Technique de prélèvement (par la voie veineuse) 7
• Section de la sérologie : Dosage de la Protéine C Réactive (CRP) 7Test qualitatif 7Test quantitatif 8
• Test qualitatif 7
• Test quantitatif 8
• Section d’Hématologie-Parasitologie 8Parasitologie 8Hématologie : Dosage du taux d’hémoglobine 10
• Parasitologie 8
• Hématologie : Dosage du taux d’hémoglobine 10
• Section de la biochimie : Dosage de la glycémie 10
• Section de la bactériologie 11ECBU 11ATB 12
• ECBU 11
• ATB 12
CHAPITRE II : COMPTE RENDU DE LA RECHERCHE ACTION 13
• PROBLEMATIQUE 14SYNTHESE BIBLIOGRAPHIQUE 15Généralités 15Définition de quelques concepts 15Vaginite 15Vaginose 15Anatomie et physiologie de l’appareil génital féminin 15Les pathologies des voies vaginales basses 17
• PROBLEMATIQUE 14
• SYNTHESE BIBLIOGRAPHIQUE 15Généralités 15Définition de quelques concepts 15Vaginite 15Vaginose 15Anatomie et physiologie de l’appareil génital féminin 15Les pathologies des voies vaginales basses 17
• Généralités 15Définition de quelques concepts 15Vaginite 15Vaginose 15Anatomie et physiologie de l’appareil génital féminin 15
• Définition de quelques concepts 15Vaginite 15Vaginose 15
• Vaginite 15
• Vaginose 15
• Anatomie et physiologie de l’appareil génital féminin 15
• Les pathologies des voies vaginales basses 17
2-2-1-1- La vaginose bactérienne 17
• Epidémiologie 17Physiopathologie 17Les vaginites 18Epidémiologie/ Physiopathologie 18Les vaginites bactériennes 19Les vaginites parasitaires 19Les vaginites mycosiques 20Diagnostic des pathologies des voies vaginales basses 20Diagnostic clinique 20Diagnostic biologique 21Vaginose bactérienne 21Vaginite à T. vaginalis 22Vaginite à C. albicans 23Diagnostic différentiel 24MATERIELS ET METHODES 26Matériels 26Matériels techniques et consommables 26Matériels de collecte 26Méthodes 26Type, lieu et période d’étude 26Population d’étude 26Phase technique 26Phase pré analytique 26Phase analytique 27Traitement et analyses statistiques 30RESULTATS 32DISCUSSION 38
• Epidémiologie 17Physiopathologie 17Les vaginites 18Epidémiologie/ Physiopathologie 18Les vaginites bactériennes 19Les vaginites parasitaires 19Les vaginites mycosiques 20Diagnostic des pathologies des voies vaginales basses 20Diagnostic clinique 20Diagnostic biologique 21Vaginose bactérienne 21Vaginite à T. vaginalis 22Vaginite à C. albicans 23Diagnostic différentiel 24
• Epidémiologie 17Physiopathologie 17Les vaginites 18Epidémiologie/ Physiopathologie 18Les vaginites bactériennes 19Les vaginites parasitaires 19Les vaginites mycosiques 20
• Epidémiologie 17Physiopathologie 17
• Epidémiologie 17
• Physiopathologie 17
• Les vaginites 18Epidémiologie/ Physiopathologie 18Les vaginites bactériennes 19Les vaginites parasitaires 19Les vaginites mycosiques 20
• Epidémiologie/ Physiopathologie 18
• Les vaginites bactériennes 19
• Les vaginites parasitaires 19
• Les vaginites mycosiques 20
• Diagnostic des pathologies des voies vaginales basses 20Diagnostic clinique 20Diagnostic biologique 21Vaginose bactérienne 21Vaginite à T. vaginalis 22Vaginite à C. albicans 23Diagnostic différentiel 24
• Diagnostic clinique 20
• Diagnostic biologique 21Vaginose bactérienne 21Vaginite à T. vaginalis 22Vaginite à C. albicans 23
• Vaginose bactérienne 21
• Vaginite à T. vaginalis 22
• Vaginite à C. albicans 23
• Diagnostic différentiel 24
• MATERIELS ET METHODES 26Matériels 26Matériels techniques et consommables 26Matériels de collecte 26Méthodes 26Type, lieu et période d’étude 26Population d’étude 26Phase technique 26Phase pré analytique 26Phase analytique 27Traitement et analyses statistiques 30
• Matériels 26Matériels techniques et consommables 26Matériels de collecte 26
• Matériels techniques et consommables 26
• Matériels de collecte 26
• Méthodes 26Type, lieu et période d’étude 26Population d’étude 26Phase technique 26Phase pré analytique 26Phase analytique 27Traitement et analyses statistiques 30
• Type, lieu et période d’étude 26
• Population d’étude 26
• Phase technique 26Phase pré analytique 26Phase analytique 27
• Phase pré analytique 26
• Phase analytique 27
• Traitement et analyses statistiques 30
• RESULTATS 32
• DISCUSSION 38
CONCLUSION 40
BIBLIOGRAPHIE 41
TABLE DES MATIERES 42
ANNEXE a
ANNEXE
Annexe 1 : Technique de coloration de GRAM
• Recouvrir le frottis du violet de Gentiane ;
• Laisser agir pendant une minute ;
• Rincer à l’eau de robinet et égoutter ;
• Recouvrir le frottis de la solution de lugol ;
• Laisser agir une minute ;
• Rincer à l’eau de robinet ;
• Décolorer le frottis à l’alcool pendant une minute ;
• Laver à l’eau et égoutter ;
• Recouvrir le frottis de fuchsine phéniquée ;
• Laisser agir pendant 20 s ;
• Laver à l’eau et égoutter ;
• Laisser sécher à l’air ;
• Observer à l’objectif x100 avec de l’huile à immersion.
Annexe 2 : Score de Nugent
ScoreForme Lactobacillus (grands bâtonnets Gram positif)Forme Gardnerella et Bactéroïdes (petits bâtonnets à Gram variable et bâtonnetsGram négatif)Forme Mobiluncus (bâtonnets courbes à Gram variable)04+0013+1+1-2+22+2+3-4+31+3+404+
0 ; 0 Score 0-3 ; normal
1+ ; < 1 Score 4-6 ; intermédiaire
2+ ; 1-4 Score ≥7 ; vaginose bactérienne
3+ ; 5- 30
4+ ; ≥ 30
Annexe 3 : Préparation des milieux de culture
• Gélose au sang frais additionnée d’acide nalidixique et de colistine
• Laisser refroidir à 45–50°C la gélose Columbia préalablement préparée ;
• Ajouter 5% de sang de mouton défibriné stérile, le mélange ANC et poly vitex
• Bien homogénéiser et couler en boîte de Pétri ;
• Laisser solidifier et conserver au réfrigérateur à 4°C.
• Gélose Trypticase soja
• Mettre 30g de poudre dans un litre d’eau distillée ;
• Mélanger soigneusement jusqu’à dissolution complète ;
• Répartir en tubes ou en flacons. Stériliser à 121°C pendant 15 minutes.
• Gélose Sabouraud
• Suspendre 65,0g dans un litre d’eau distillée ;
• Chauffer jusqu’à la dissolution totale ;
• Autoclaver à 121°C pendant 15 minutes.
• Gélose chocolat
• A partir de la gélose Columbia préalablement préparée, et non refroidie ajouter 5mL de sang de mouton à 5% et 5mL de sang de poly vitex
• Mélanger et couler en boîte de pétri.
• Gélose Mueller-Hinton
• Mettre 36g de poudre dans un litre d’eau distillée ;
• Porter à l’ébullition jusqu’à dissolution complète ;
• Stériliser à l’autoclave à 121°C pendant 15minutes et répartir en tubes ou flacons.
• Gélose Columbia
• Prélever 39g de gélose Columbia ;
• Dissoudre dans 1L d’eau distillée ;
• Bouillir, Autoclaver à 121°C pendant 15minutes.
Le travail est divisé en plusieurs pages (articles). Voici la liste :