Analyse des paramètres physico-chimiques dans les zones humides en Algérie

L’étude des paramètres physico-chimiques en Algérie révèle des mesures précises du pH, de la température et de la conductivité électrique dans les zones humides classées Ramsar d’Oran et de Bechar. Ces analyses sont essentielles pour comprendre la dynamique écologique et la qualité de ces écosystèmes.

Analyse des paramètres physico-chimique :

1. Mesure du pH :

Le pH des différents échantillons est mesuré in situ à l’aide d’un pH-mètre digital de terrain préalablement étalonné à pH 4,7 et 10.

1. Mesure de la température :

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La température de l’eau de chacun des 03 échantillons est mesurée à l’aide d’un thermomètre de terrain.

Photo 4 : Un thermomètre de terrain

1. Mesure de la conductivité électrique (CE) norme AFNOR T91- 031 :

La mesure de la CE réalisée à l’aide d’un conductimètre est calculée selon l’équation suivante :

CE= CE lue X F(t) / K CE : conductivité électrique ; F(t) : facteur température ; K : constante= 0,63.

Tableau 13 : Mesures des paramètres physico-chimiques du premier prélèvement (Juin, 2011)

Tableau 14 : Mesures des paramètres physico-chimiques du second prélèvement (Septembre, Octobre 2011)

Tableau 15 : Mesures des paramètres physico-chimiques du troisième prélèvement (Mars 2012)

Tableau 16 : Mesures des paramètres physico-chimiques du Quatrième prélèvement (Juin 2012)

2.1.4- Détermination des matières en suspension :

Les matières en suspension sont déterminées par pesée différentielle suivant la formule de (Rodier et al, 2005), après vaporisation de l’échantillon à une température de 150°C pendant 2 heures.

MES (mg/l) = Pp-PV x 100000/100 = (Pp-PV) x 10000

Pp : Poids plein du filtre

PV: Poids vide du filtre

Tableau 17 : Mesures des MES matières en suspension durant les quatre prélèvements

Caractérisation bactériologique :

1. Méthodes d’énumération des coliformes :

Pour un contrôle de routine de la qualité microbiologique des eaux de surfaces on utilise la technique classique de la détermination du NPP le nombre le plus probable pour cela des dilutions décimales de l’échantillon sont inoculées dans une séries de tubes contenant un milieu de culture liquide spécifique et une loi statistique permet de calculer le NPP sur la base de la proportion de tubes positifs dans chaque dilution (Rompre et al, 2002)

L’exemple utilisé dans notre cas d’étude et la méthode de colimétrie en milieu liquide

1. Colimétrie En Milieu Liquide : (Manuel des TP, 2004)

a)- Recherche et dénombrement des germes tests de contamination fécale : (Manuel des TP, 2004)

Le figure 19 représente le test de présomption réservé à la recherche des coliformes totaux et le teste de confirmation réservé à la recherche des coliformes fécaux.

b)- Recherche et dénombrement des coliformes totaux avec identification d’Escherichia. Coli : (Manuel des TP, 2004)

La recherche et le dénombrement des coliformes ainsi que l’identification d’Escherichia. Coli ont été réalisé selon la technique de la colimétrie en milieu liquide qui comporte deux étapes :

• Une recherche présomptive des coliformes.
• Un test de confirmation d’Escherichia coli.

Le dénombrement est effectué suivant la méthode du nombre le plus probable (N.P.P) (Ghizellaoui, 1994).

1. Test présomptif : recherche et dénombrement des coliformes totaux (C.T) :

Ce test consiste à l’ensemencement et à lecture du milieu B.C.P.L (Bouillon Lactosé au bromocrésol pourpre) simple et double concentration qui permet le dénombrement des coliformes, par la fermentation du lactose et la production de gaz (Diagnostic Pasteur, 1987).

L’ensemencement et la lecture du milieu est représenté dans la figure 19.

Lecture :

Sont considérés comme positifs (pouvant contenir des coliformes) les tubes où il se produit simultanément :

• Un dégagement de gaz dans la cloche de Durham (doit occuper au moins 1/10 du volume de la cloche).
• Une culture avec un virage de l’indicateur coloré (le virage du bromocrésol pourpre au jaune due à la fermentation du lactose).

Nous notons le nombre de tubes positifs dans chaque série, puis nous nous reportons à la table de Mac Grady pour déterminer le nombre de coliformes présents dans 100ml d’échantillon (Ghizellaoui, 1994).

Remarque :

L’étape de la colimétrie basée sur la propriété commune aux coliformes de fermenter le lactose en produisant du gaz ne permet que de présumer de leur présence dans l’eau analysée. A ce niveau de fausses réactions peuvent se produire :

• De fausses réactions positives peuvent être dues aux Clostridium et aux Bacillus.
• De fausses réactions négatives peuvent résulter d’antagonismes microbiens, de la présence de bactériophages ou d’un taux élevé de nitrate (Ghizellaoui, 1994).

b.2. Test confirmatif : recherche et dénombrement d’Escherichia coli:

Test de Mac kensie : (Ghizellaoui, 1994).

A partir de chaque milieu B.C.P.L positif, nous ensemençons :

• Un tube de milieu Schubert munis d’une cloche de Durham.
• Un tube d’eau peptonée exempte d’indole. Tous les tubes sont incubés à 44°C pendant 48h. Lecture :

La présence d’Escherichia coli est confirmée dans le tube primaire positif s’il se produit simultanément :

• Un trouble dans le tube du milieu Schubert avec présence de gaz dans la cloche.
• Un trouble et une réaction indole positif se traduite par une coloration rouge à la surface du milieu après addition de réactif de Kovacs dans le tube de l’eau peptonée exempte d’indole.

Nous notons le nombre de tubes positifs et nous nous reportons à la table de Mac Grady pour déterminer le N.P.P d’Escherichia coli pour 100ml de l’échantillon (Ghizellaoui, 1994).

c)- Recherche et dénombrement des Streptocoques fécaux :

La recherche et le dénombrement des Streptocoques fécaux sont réalisés selon la technique de colimétrie en milieux liquides. Les milieux utilisés sont : le milieu de Rothe Simple et Double concentration, qui contient comme agent sélectif l’azide de sodium (inhibiteur de la flore secondaire Gram négatif) et le milieu de Litsky-Eva qui renferme en plus de l’azide de sodium une faible concentration de cristal violet qui freine le développement des bactéries Gram positif (Ghizellaoui, 1994).

1. Test présomptif :

Ce test consiste à l’ensemencement et la lecture du milieu de Rothe selon le schéma comme nous avons cité pour les coliformes.

1. Test confirmatif :

A partir des tubes positifs nous ensemençons des tubes de milieu Litsky-Eva. Les tubes sont ensuite incubés 37°C pendant 24 à 48h.

Lecture :

Sont considérés comme positifs les tubes où il y’a apparition d’un trouble du milieu qui confirme la présence de Streptocoques fécaux, parfois, la culture s’agglomère au fond du tube en fixant le colorant et en formant une pastille violette de signification identique à celle du trouble.

Nous avons effectué le diagnostic bactériologique des Streptocoques par un simple examen microscopique (direct ou après coloration de Gram) qui doit faire apparaître la présence de cocci Gram positif, en courtes chaînettes ou en diplocoques (Ghizellaoui, 1994).

L’échantillon d’eau mère

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Analyse par introduction en tube

10ml

1ml

0.1ml

BCPL/DC BCPL/SC

BCPL/DC

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Incubation 37C° pendant 24 à 48 heures

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– – –

+ – –

– – –

Lecture

– : résultat négatif

+ : résultat positif

Figure 24 : Protocole de la technique de colimetrie en milieu liquide test présomptif et confirmatifs (Ghizellaoui, 1994).

Milieu BCPL positif

Milieu Schubert

Incubation

Lecture

Figure 25 : Protocole de la technique de colimetrie en milieu liquide Test de Mac kensie : (Ghizellaoui, 1994).